Gid Syans pou Ete a: Lè yon Vag Chalè 40°C Rankontre Eksperyans Molekilè

Dènyèman, tanperati ki wo yo te pèsiste nan yon gwo pati nan Lachin. Nan dat 24 jiyè, Obsèvatwa Metewolojik Pwovens Shandong lan te pibliye yon alèt jòn pou tanperati ki wo, li te predi tanperati "tankou sona" ant 35-37°C (111-133°F) ak 80% imidite pou kat jou kap vini yo nan zòn ki andedan peyi a. Tanperati nan kote tankou Turpan, Xinjiang, ap apwoche 48°C (111-133°F). Wuhan ak Xiaogan, Hubei, anba yon alèt zoranj, ak tanperati ki depase 37°C nan kèk zòn. Nan chalè boule sa a, mond mikwoskopik ki anba sifas pipèt yo ap fè eksperyans twoub dwòl—estabilite asid nikleyik yo, aktivite anzim yo, ak eta fizik reyaktif yo tout defòme an silans pa vag chalè a.

Ekstraksyon asid nikleyik la vin tounen yon kous kont tan. Lè tanperati deyò a depase 40°C, menm avèk èkondisyone a limen, tanperati tab operasyon an souvan monte pi wo pase 28°C. Nan moman sa a, echantiyon ARN yo kite deyò degrade plis pase de fwa pi vit pase nan sezon prentan ak otòn. Nan ekstraksyon pèl mayetik, solisyon tanpon an satire lokalman akòz volatilizasyon akselere sòlvan an, epi kristal yo presipite fasilman. Kristal sa yo pral lakòz gwo varyasyon nan efikasite kaptire asid nikleyik la. Volatilité sòlvan òganik yo ogmante an menm tan. A 30°C, kantite volatilizasyon klorofòm ogmante pa 40% konpare ak 25°C. Pandan operasyon an, li nesesè pou asire ke vitès van an nan kapo a se 0.5m/s, epi sèvi ak gan nitril pou kenbe efikasite pwoteksyon an.

Eksperyans PCR yo fè fas ak twoub tanperati ki pi konplèks toujou. Reyaktif tankou anzim Taq ak transkriptaz envès yo trè sansib a varyasyon tanperati toudenkou. Kondansasyon sou mi tib yo apre yo fin retire yo nan yon frizè -20°C ka lakòz plis pase 15% pèt aktivite anzim si li antre nan sistèm reyaksyon an. Solisyon dNTP yo kapab montre tou yon degradasyon detektab apre sèlman 5 minit ekspozisyon nan tanperati chanm (>30°C). Operasyon enstriman an tou anpeche pa tanperati ki wo. Lè tanperati anbyen laboratwa a >35°C epi espas disipasyon chalè enstriman PCR a pa ase (<50 cm soti nan miray la), diferans tanperati entèn lan ka rive jiska 0.8°C. Devyasyon sa a ka lakòz efikasite anplifikasyon nan kwen yon plak 96-pi diminye plis pase 40%. Filtè pousyè yo ta dwe netwaye regilyèman (akimilasyon pousyè diminye efikasite disipasyon chalè a pa 50%), epi yo ta dwe evite èkondisyone dirèk. Anplis de sa, lè w ap fè eksperyans PCR lannwit lan, evite itilize enstriman PCR a kòm yon "frijidè enprovize" pou estoke echantiyon yo. Depo nan 4°C pou plis pase 2 èdtan ka lakòz kondansasyon fòme apre kouvèti chofe a fèmen, sa ki ka dilye sistèm reyaksyon an epi potansyèlman korode modil metal enstriman an.

Lè laboratwa molekilè yo ap fè fas ak avètisman pèsistan sou tanperati ki wo, yo ta dwe sonnen alam lan tou. Echantiyon ARN presye yo ta dwe estoke nan dèyè yon frizè -80°C, ak aksè limite pou peryòd tanperati ki wo. Louvri pòt yon frizè -20°C plis pase senk fwa pa jou ap vin pi mal varyasyon tanperati yo. Ekipman ki pwodui anpil chalè mande omwen 50 cm espas pou disipasyon chalè sou tou de bò yo ak sou kote dèyè yo. Anplis de sa, li rekòmande pou restriktire orè eksperimantal la: 7:00-10:00 AM pou operasyon sansib a tanperati tankou ekstraksyon ARN ak chajman qPCR; 1:00-4:00 PM pou travay ki pa eksperimantal tankou analiz done. Estrateji sa a ka anpeche pik tanperati ki wo yo entèfere ak etap kritik yo avèk efikasite.

Eksperyans molekilè pandan yon vag chalè se yon tès teknik ak pasyans. Anba solèy ete san rete a, petèt li lè pou ou mete pipèt ou atè epi ajoute yon bwat glas anplis nan echantiyon ou yo pou pèmèt enstriman an gaye plis chalè. Respe sa a pou varyasyon tanperati yo se jisteman kalite laboratwa ki pi presye pandan mwa ete cho yo—apre tou, nan chalè 40°C ete a, menm molekil yo bezwen yon "rejyon polè atifisyèl" ki byen pwoteje.